采樣 

采樣按GB/T14699.1（ISO 6497:2002,IDT）進(jìn)行。 

重要的是實驗室收到份真正有代表性的樣品并在運(yùn)輸及保存過程中不受到破壞或不發(fā)生變化。

8 試樣制備 

試樣按GB/T 20195 制備。 

用粉碎裝置（6.1）將實驗室風(fēng)干樣粉碎，使其能通過篩孔為1mm的篩，充分混合。 

如手工操作方法，按第9章處理。

如用半自動操作方法，則按第10章處理。

9 手工操作法分析步驟

9.1 試料 

稱取約1g制備的試樣（第8章），準(zhǔn)確至0.1mg（m1）。 

如果試樣脂肪含量超過100g/kg，或試樣中脂肪不能用石油醚（5.8）直接提取，則將試樣裝移至濾堝（6.3），并按9.2處理。 

如果試樣脂肪含量不超過100g/kg，則將試樣裝移至燒杯（6.6）。如果其碳酸鹽（碳酸鈣形式）超過50g/kg，按9.3處理；如果碳酸鹽不超過50g/kg，則按9.4處理。

9.2 預(yù)先脫脂 

在冷提取裝置（6.10）中，在真空條件下，試樣用石油醚（5.8）脫脂3次，每次用石油醚30mL，每次洗滌后抽吸干燥殘渣，將殘渣裝移至燒杯（6.6）。

9.3 除去碳酸鹽 

將100mL鹽酸（5.2）傾注在試樣上，連續(xù)振搖5min，小心將此混合物傾注濾堝，濾堝底部覆蓋薄層濾器輔料（5.6）。 

用水洗滌兩次，每次用水100mL，細(xì)心操作終使盡可能少的物質(zhì)留在濾器上。

將濾堝內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至原來的燒杯中并按9.4處理。

9.4 酸消煮

將150mL硫酸（5.3）傾注在試樣上。盡快使其沸騰，并保持沸騰狀態(tài)30min±1min。 

在沸騰開始時，轉(zhuǎn)動燒杯段時間。如果產(chǎn)生泡沫，則加數(shù)滴防泡劑（5.7）。在沸騰期間使用個適當(dāng)?shù)睦鋮s裝置保持體積恒定（見6.6和6.11）。

9.5 次過濾 

在濾堝中（6.3）鋪層濾器輔料（5.6），其厚度約為濾堝高度的五分之，濾器輔料上可蓋篩板（6.4）以防濺起。 

當(dāng)消煮結(jié)束時，將液體通過個攪拌棒濾至坩堝中，用弱真空抽濾，使150mL幾乎全部通過。如果濾器堵塞，則用個攪拌棒小心地移去覆蓋在濾器輔料上的粗纖維。 

殘渣用熱水洗洗5次，每次約10mL水，要注意使濾堝的過濾板始終有濾器輔料覆蓋，使粗纖維不接觸濾板。 

停止抽真空，加定體積的丙酮（5.5），剛好能覆蓋殘渣，靜置數(shù)分鐘后，慢慢抽濾排出丙酮，繼續(xù)抽真空，使空氣通過殘渣，使之干燥。

9.6 脫脂 

在冷提取裝置（6.10）中，在真空條件下，試樣用石油醚（5.8）脫脂3次，每次用石油醚30mL，每次洗滌后抽吸干燥。

9.7 堿消煮 

將殘渣定量轉(zhuǎn)移至酸消煮用的同燒杯中。 

加150mL氫氧化鉀溶液（5.4），盡快使其沸騰，保持沸騰狀態(tài)30min±1min，在沸騰期間用同適當(dāng)?shù)睦鋮s裝置（6.6和6.11）使溶液體積保持恒定。

9.8 第二次過濾 

將杯內(nèi)容物通過濾堝（6.3）過濾，濾堝內(nèi)鋪有層濾器輔料（5.6），其厚度約為濾堝高度的五分之，上蓋篩板（6.4）以防濺起。

殘渣用熱水洗至中性。 

殘渣在真空條件下用丙酮（5.5）洗滌3次，每次用丙酮30mL，每次洗滌后抽吸干燥殘渣。

9.9 干燥 

將濾堝置于灰化皿（6.5）中，灰化皿及內(nèi)容物在130℃干燥箱中（6.7）中至少干燥2h。 

在灰化或冷卻或冷卻過程中，濾堝的燒結(jié)濾板可能有些部分變得松散，從而可能導(dǎo)致分析結(jié)果錯誤，因此將濾堝置于灰化皿中。 

濾堝和灰化皿在干燥器（6.8）中冷卻，從干燥器中取出后，立即對濾堝和灰化皿進(jìn)行稱量（m2），準(zhǔn)確至0.1mg。

9.10 灰化 

將濾堝和灰化皿置于馬福爐（6.9）中，其內(nèi)容物在500℃±25℃下灰化，直至冷卻后連續(xù)兩次稱量的差值不超過2mg。 

每次灰化后，讓濾堝和灰化皿初步冷卻，在尚溫?zé)釙r置于干燥器中，使其*冷卻，然后稱量（m3），準(zhǔn)確至0.1mg。

9.11 空白測定 

用大約相同數(shù)量的濾器輔料（5.6），按9.4至9.10進(jìn)行空白測定，但不加試樣。

灰化（9.10）引起的質(zhì)量損失不應(yīng)超過2mg。

按第11章處理。